sam. août 29, 2020 12:35 pm
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Introduction Les néoplasmes myéloprolifératifs (NPP) classiques BCR-ABL négatifs comprennent la polycythémie vraie (PV), la thrombocytémie essentielle (ET) et la myélofibrose primaire (PMF). Il s'agit de troubles clonaux acquis des cellules souches hématopoïétiques (CSH) conduisant à l'hyperplasie d'une ou plusieurs lignées myéloïdes. Les MPN sont causés par trois mutations récurrentes principales: JAK2V617F, des mutations dans les gènes des récepteurs de la calréticuline (CALR) et de la thrombopoïétine (MPL). Le traitement à l'interféron alpha (IFNα) induit non seulement une réponse hématologique dans environ 70% des myélofibroses ET, PV et précoces, mais également une réponse moléculaire significative sur les cellules mutées JAK2V617F et CALR. Cependant, une réponse moléculaire complète n'est obtenue que chez environ 20% des patients. Notre objectif est de prédire l'efficacité à long terme de l'IFNα chez les patients mutés par JAK2V617F et CALR en surveillant le sort du HSC muté initiateur de la maladie afin de mieux stratifier les répondeurs moléculaires. Méthodes Une étude observationnelle longitudinale (3-5 ans) a été réalisée chez 46 patients traités par IFNα. La distribution de la maladie MPN était de 42% ET, 47% PV et 11% PMF. Nous avons détecté 33 patients avec une mutation JAK2V617F, 11 avec des mutations CALR (7 de type 1 / type 1 et 4 de type 2 / type 2), 1 avec les mutations JAK2V617F et CALR et 1 avec JAK2V617F, mutation CALR et MPLS505N. A des intervalles de 4 mois, la fréquence des allèles des variants de mutation JAK2V617For CALR a été mesurée dans les cellules matures (granulocytes, plaquettes). Simultanément, l'architecture clonale a été déterminée en étudiant la présence des mutations dans les colonies dérivées des différentes populations de cellules souches et progénitrices hématopoïétiques (HSPC) (CD90 + CD34 + CD38-HSC enrichies, CD90-CD34 + CD38- immatures et CD34 + CD38 + progéniteurs engagés). Nous avons utilisé une combinaison de modélisation mathématique (Michor et al., Nature, 2005) et d'analyse bayésienne pour déduire le comportement à long terme du HSC muté. Résultats Après un suivi médian de 40 mois, l'IFNα a ciblé plus efficacement et plus rapidement le HSPC, en particulier les progéniteurs enrichis en HSC, que les cellules sanguines matures chez les patients JAK2V617F (p <0,05). De plus, la cinétique de réponse de JAK2V617FHSPC homozygote à l'IFNα était plus rapide que celle des cellules HSPC hétérozygotes et matures. Cette spécificité de l'IFNα vis-à-vis des HSPC homozygotes a légèrement augmenté après un suivi médian de 51 mois. En revanche, au cours d'un suivi médian de 40 mois des patients mutés CALR, l'IFNa ciblait de manière similaire le HSPC et les cellules matures. De plus, l'IFNα était moins efficace pour cibler le CALR muté que le JAK2V617FHSPC (p <0,05
Puisqu'il est très difficile de purifier le vrai HSC des patients, nous avons utilisé une combinaison de modélisation mathématique et statistique pour déduire le comportement et la cinétique du HSC muté ciblé par IFNα. Le modèle a donné un bon ajustement aux données et a indiqué que les HSC mutées sont épuisées lentement (> 1 an) avec une augmentation concomitante des HSPC mutées et des granulocytes chez les patients bien répondeurs. Nous avons calculé le taux de diminution du HSC pour chaque patient. Les taux de diminution sont très faibles pour le JAK2V617F hétérozygote et le HSC muté CALR et plus élevés pour le JAK2V617FHSC homozygote, mais tous augmentent avec une dose élevée d'IFNα (> 100 µg / semaine). De plus, une très faible proportion de HSC mutées hétérozygotes par rapport à une proportion élevée peut être ciblée plus facilement chez les patients. Les mutations associées au diagnostic et au dernier moment ont également été étudiées à l'aide d'un panel myéloïde ciblé NGS. Les résultats indiquent que l'IFNa n'induit aucune autre mutation sur des gènes supplémentaires et l'approche mathématique prédit que les mutations associées n'ont pas d'impact majeur sur le taux de diminution du HSC.
Conclusion Au total, en utilisant une méthode rigoureuse d'inférence statistique, nos résultats montrent que l'IFNα épuise le HSC muté humain par différenciation en HSPC et cellules matures. Cela est probablement dû au fait que l'IFNα induit une plus forte prolifération des mutations par rapport aux HSC de type sauvage, comme précédemment montré dans un modèle murin (Mullally et al., Blood, 2013). Notre étude prédit que l'IFNα peut éradiquer lentement le HSC muté, mais cet effet bénéfique serait plus efficace: i) chez les patients avec JAK2V617F homozygote par rapport à ceux avec JAK2V617F hétérozygote ou muté CALR, ii) avec une dose élevée d'IFNα, iii) chez les patients avec très faible proportion de JAK2V617F hétérozygote et de HSC mutée CALR. Ainsi, cette étude aidera à stratifier les patients pour un traitement par IFNα. Ces résultats pourraient également expliquer les différents résultats dans les essais cliniques actuels sur l'IFNα. Divulgations Constantinescu: Novartis: Membre du conseil d'administration ou des comités consultatifs d'une entité, Bureau des conférenciers; AlsaTech: Autre: Cofondateur; AgenDix GmbH: Autre: Co-fondateur, MyeloPro Research and Diagnostics; Wiley & Sons: Autre: Rédacteur en chef, Journal of Cellular and Molecular Medicine. Kiladjian: Orphelin AOP: Honoraires, financement de la recherche; Novartis: Honoraires, financement de la recherche; Celgene: Consultance.